2019.03.22 乾熱滅菌及濕熱滅菌之操作
一、實驗目的 如何正確使用乾熱滅菌(oven)、高壓殺菌釜(autoclave)及其適用對象。 二、實驗原理 ๐乾熱滅菌:直接加熱以火焰或高熱使細菌、維生物喪失活性或水分而死亡。(適用於 乾燥的玻璃器皿 ) ๐濕熱滅菌:用的是高壓蒸氣滅菌器。利用壓力下飽和蒸氣使細菌之蛋白酵素產生凝固變性，達到滅菌效果。(適用於 耐高溫之培養基 ) 三、實驗藥品&材料 1、生理食鹽水 1公升 2、培養液 1公升 (RO水: agar=100:4 ) 3、鋁箔 1捲 4、全脂棉花 1包 儀器 、器材 5、試管 5支 6、培養皿 6個 7、三角瓶(250mL) 2個 8、量筒 1個 9、有刻度吸量管(10mL) 5支 10、不銹鋼桶 1個 11、不鏽鋼籃 1個 12、乾熱滅菌器(須附記時器) 13、高壓滅菌釜(須附記時器) 四、實驗操作 乾熱滅菌 1、製作試管、三角錐棉花塞。 實驗照片(ㄧ)、製作三角錐棉花塞 2、將定量吸管 尖端朝下 輕放入不鏽鋼罐中跟將培養皿要 倒放 不鏽鋼罐後，放入乾熱滅菌器。 實驗照片(二)、培養皿放入不鏽鋼罐 實驗照片(三)、定量吸管放入不鏽鋼罐 3、設定溫度: 170度、2小時 。滅菌完需等溫度降至80度以下方可打開門。 實驗照片(四)、乾熱滅菌器操作 濕熱滅菌 1、首先，我們配置培養基(考試時試場會準備好)。作業時，每個人會拿到6個培養皿，每個培養皿要有15g的培養液。方便計算直接配置100g的培養液。細菌培養液配置比例: 1000ml(RO水):40g(agar) 。所以100ml的 RO水 需要4g的agar，因為要三重覆，所以需要秤12 g的 agar。 其他相關配置培養基資訊: 班導 阿源小站 Preparation of TSB, TSA, MRS, and PDA --製備 TSB, TSA, MRS, PDA 培養基 實驗照片(四)、秤量12 g的 agar。 2、配置完後 用鋁箔封住三角瓶再用滅菌膠帶貼住鋁箔。 實驗照片(五)、配置完成的培養液。 3、高壓滅菌內部加水(需淹過內底部圓盤)，並將